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大鼠脊髓神經(jīng)干細胞
產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 ： 大鼠脊髓神經(jīng)干細胞
產(chǎn)品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 脊髓組織
產(chǎn)品規(guī)格 ： 5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
大鼠脊髓神經(jīng)干細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H 形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。
脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細胞。需要強調(diào)的是，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中，不同的神經(jīng)干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同，分布也不同。神經(jīng)干細胞作為干細胞的一種，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。
神經(jīng)干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向神經(jīng)細胞、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。神經(jīng)干細胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)干細胞采用胰蛋白酶消化后差速貼壁，結(jié)合神經(jīng)干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)干細胞經(jīng)N estin免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ： 含B-27 Supplem ent、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 懸浮
細胞形態(tài) ： 球形
傳代特性 ： 可傳2-3代
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶，A ccutase
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠脊髓神經(jīng)干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
大鼠脊髓神經(jīng)干細胞是一種懸浮細胞，細胞形態(tài)呈球形，在通蔚生物技術(shù)部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中，用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀。
3-1) 添 加 0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中，用吸管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min；消化結(jié)束后，加入胰酶抑制劑(避免使用血清)終止消化，用吸管輕輕吹打，分散神經(jīng)干細胞球。
3-2) 建議使用A ccutaseT M 消化液，添加消化液1m L至離心管中，用吸管輕輕吹打混勻，37℃溫浴5-8min；消化結(jié)束后，無需終止，用吸管輕輕吹打，分散神經(jīng)干細胞球。
3-3) 若神經(jīng)干細胞球較小，可加入2ml完全培養(yǎng)基，直接用吸管輕輕吹打，分散神經(jīng)干細胞球。
4)1200rpm 離心5min，棄上清，收集細胞沉淀；加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻；按傳代比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
5) 待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，培養(yǎng)觀察；之后按換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
