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胃蛋白酶(Pepsin)活性檢測(cè)試劑盒(UV法)
測(cè)定意義
測(cè)定意義
胃蛋白酶由胃粘膜主細(xì)胞分泌，分解食物中蛋白質(zhì)成小肽段。一般用于神經(jīng)性低酸癥的鑒別，慢性胃炎、慢性胃擴(kuò)張、慢性十二指腸炎等癥狀時(shí)也會(huì)引起胃蛋白酶分泌的減少。
測(cè)定原理
胃蛋白酶可催化血紅蛋白水解，水解產(chǎn)物在280nm有特征吸收峰。通過(guò)計(jì)算吸光值的變化來(lái)計(jì)算酶活。
自備儀器和用品
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔UV板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
試劑清單
注意
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試劑名稱 |
規(guī)格 |
數(shù)目 |
貯藏 |
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試劑一 |
液體100uL |
x1 |
4℃ |
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試劑二 |
液體20mL |
x1 |
4℃ |
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試劑三 |
粉劑 |
x1 |
4℃,避光 |
臨用前加入10mL試劑二充分溶解 |
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試劑四 |
粉劑 |
x1 |
4℃ |
臨用前加入10mL蒸餾水充分溶解 |
注意
正式測(cè)定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問(wèn)題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；
5、通過(guò)3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
