應(yīng)用范圍
應(yīng)用于帶有V5標(biāo)簽的融合蛋白或其蛋白復(fù)合物的免疫沉淀。
V5標(biāo)簽可以位于蛋白的N端,C端或中間,如N端V5融合蛋白(V5–Protein)、C端V5融合蛋白(Protein- V5)和Met修飾的N端V5融合蛋白(Met- V5–Protein)。
抗體屬性
兔單克隆抗體,IgG2a亞型。
磁珠屬性
磁珠,平均粒徑1μm。
磁珠載量及使用方法
0.5mL納米磁珠,共價偶聯(lián)0.1mg Anti-V5小鼠單克隆抗體。
常規(guī)IP或Co-IP用量,取107個細(xì)胞,加入1mL NP-40裂解液,冰上孵育30min,將細(xì)胞連同裂解液轉(zhuǎn)移到1.5mL EP管中,12000rpm離心10min,取上清裂解液400μL,加入30μL磁珠,室溫翻轉(zhuǎn)孵育1h,孵育期間加入蛋白酶抑制劑,抑制劑的選擇根據(jù)實驗需求而定,使用磁力架分離磁珠,使用預(yù)冷的PBS清洗三次磁珠,加入20μL NP-40裂解液,再加入20μL 2×loading buffer,煮樣,用作SDS-PAGE,每孔上樣量20μL。
檢測結(jié)果

從左往右,泳道依次為Marker,未結(jié)合蛋白的磁珠,下拉融合V5標(biāo)簽的靶標(biāo)蛋白。
儲存條件
4℃,18個月
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3. 本產(chǎn)品以懸液形式提供親和磁珠,懸液中磁珠的含量為25%,使用前先溫和重懸磁珠懸液,然后按照需求取用。
4. 勿離心、冷凍、干燥磁珠,勿使用超聲處理磁珠,勿使酸處理磁珠時間超過10min。
5. 混勻磁珠時,請采用移液槍輕柔吹打,柔和渦旋,上下顛倒及搖床混勻等方法。勿使用超聲等方法。
6. 配套使用的相關(guān)試劑,需實驗室自備。
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